基因剪輯與抗癌研究室

基因治療(gene therapy)自從基因組編輯(genome editing)技術出現後取得快速進展，基因組編輯利用引導序列(guide sequence)可將一段基因從一特定位址精確的剔除(knock ... ::: 腫瘤基因調控研究室 基因剪輯與抗癌研究室 橋接實驗室 高通量多質體學實驗室 抗體及融合瘤核心實驗室 粒線體醫學與生殖醫學研究室 林景堉老師研究室 細菌致病因子之蛋白質結構與功能研究 劉兆蓮老師研究室 神經退化標誌研究室 ::: 實驗室名稱：基因剪輯與抗癌研究室 主持人：李嘉華老師 基因治療(genetherapy)自從基因組編輯(genomeediting)技術出現後取得快速進展，基因組編輯利用引導序列(guidesequence)可將一段基因從一特定位址精確的剔除(knockout)或插入(knockin)以達到疾病治療目的。

CRISPR原是細菌或古菌的後天免疫系統，當細菌捕獲入侵的病毒後，會剪輯留下病毒的一個DNA片段當成記憶，做為未來免疫防衛之用。

Cas9是一種內切核酸酶(endonucleases)蛋白質。

結合兩種物質組成的系統CRISPR/Cas9便可以用來執行基因組編輯的功能。

本實驗室近年也跨足基因編輯技術用於癌症治療的領域當中。

此外我們發展以慢病毒(lentivirus)與腺病毒(adeovirus)作為細胞感染途徑，此部分鏈結可快速將體外研究應用於活體動物中，以達到未來臨床應用的可能性。

目前，本實驗室聚焦在兩大方向: 以基因剪輯方式用於抗癌的應用:(1) 致癌基因之基因剪輯用於三陰性乳癌(TNBC)抗癌策略開發。

(2) 以基因剪輯模式開發急、慢性血癌(leukemia)之活體治療模式。

  以分子生物學模式開發快速細胞凋亡(apoptosis)或細胞自噬(autophage)於體外或活體檢測技術。

此快速檢測平台利用冷光酶蛋白互補方式(luciferasecomplementaryassay)觀察胱天蛋白酶(caspase)活化程度，此技術可用於各癌症類型的高通量抗癌藥物篩選。

圖一: 以EGFR 基因剪輯病毒作用於MDA-MB-231三陰性乳癌細胞。

A:EGFR_KO1造成對偶基因各1bp插入與8bp剔除，而EGFR_KO2造成對偶基因11bp剔除。

B: 西方墨點法證實MDA-MB-231之EGFR蛋白剔除並C:明顯抑制乳癌細胞生長。

圖二: 以ABL 基因剪輯病毒治療K562-慢性骨髓性白血病(CML)。

A: 西方墨點法證實ABL 基因剪輯病毒有效抑制K562費城染色體(BCR-ABL)蛋白，並誘發細胞凋亡(c-PARP)與細胞週期抑制蛋白生成。

B:ABL 基因剪輯病毒抑制CML血癌細胞生長。

C: 以ABL 基因剪輯病毒於小鼠活體治療K562血癌，免疫缺陷小鼠接受人類K562血癌細胞後，三周後以尾靜脈注射ABL 基因剪輯病毒並以非侵入性活體影像系統(IVIS)觀察K562血癌治療效果(Ventral-腹部，Dorsal-背部; 細胞數量由少-藍色到多-紅色變化)。

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