DNA甲基化分析 - 豐技生物科技

EpiTYPER DNA 甲基化分析原理 ... 此時T7 RNA polymerase 可利用此序列進行in vitro transcription 合成出RNA，並同時將序列中的CTP 置換成為dCTP。

Skiptocontent 上一頁 下一頁 DNA甲基化分析 EpiTYPERDNA甲基化分析原理 包含四個反應步驟：Bisulfiteconversion、PCR、MassCLEAVE(T7-IVTandBase-specificRNAcleavage)及Massdetection。

Bisulfiteconversion後，未甲基化之C將被轉換成U，而甲基化的C鹼基將維持C之型態。

經PCR反應增幅時，所使用的reverseprimer因帶有T7RNApolymerasepromoter序列，此時T7RNApolymerase可利用此序列進行invitrotranscription合成出RNA，並同時將序列中的CTP置換成為dCTP。

RNA產物再由RNaseA進行Base-specificcleavage。

RNaseA能截切RNA序列中的C與U的位置，由於CTP已事先置換成dCTP，因此RNaseA將只會專一性的截切U之位置。

整個序列通常會被截切成數十個片段，片段中如果帶有CpGsite，會因為甲基化狀態出現出兩種序列(GC或AC)，此兩種序列分別表示甲基化或者是未甲基化的DNA。

在質譜分析可以觀察到兩種序列為分子量大小相差16Da的訊號，根據訊號波峰面積比率即可推算出該CpGsite甲基化比例。

特色與優點： 質譜偵測技術提供精準的甲基化定量結果 分析數據CV<5%，定量線性範圍5%~95% 單一反應最長分析達600bp之區域 不需定序、可快速分析 優異的花費效益與樣本容載率 分析服務流程與方式： 客戶準備序列資訊 本公司進行Primer設計與實驗評估，並寄送設計結果報告 客戶根據設計的primer序列進行PCR測試 客戶提供成功的膠圖結果給本公司評估是否可進行實驗 客戶準備BisulfitePCR產物送件 本公司進行後續實驗分析 產出結果報告 分析服務檢體需求： 接受檢體形式:BisulfitePCR產物 最少樣本數量:24reactions 樣本總需求量:10μlBisulfitePCR產物 須注意： 膠圖上的樣本必須為singleband 若膠圖顯示primerdimer嚴重，會影響實驗成功機率 請使用豐技實驗室建議的primer進行PCR 附件下載: EpiTyper分析服務簡介EpiTyper設計結果報告範例EpiTyper報告呈現資料 jeff2021-08-05T08:51:50+08:002017/10/13|醫療資訊| 立即將此篇文章分享給您的朋友！ FacebookTwitterEmail: 搜索結果： 近期文章 豐技/Agena將於3月16日舉辦線上研討會 豐技代理SeraCare產品，並將於2月7日舉辦線上研討會 2021台灣醫療科技展-豐技提供新生兒篩檢、癌症精準醫療、病原體檢測技術 11月28日病理學年會，豐技邀請您一同探索癌症精準醫療技術 豐技生技邀請您一同參與11月13日粒線體醫療研討會 GotoTop