改良式病毒包裝系統| ABM Packaging System病毒表現最佳化 ...
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對於慢病毒顆粒(lentiviral particles) 的生產,通常需要三種組分:1. 包含您感興趣的插入物(cDNA,shRNA或miRNA)的慢病毒載體(lentiviral vector) 。
2. 包裝含有所有 ...
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改良式病毒包裝系統|ABMPackagingSystem病毒表現最佳化貨號LV003
代理廠牌:
原廠連結:
http://www.abmgood.com/Lentivirus-Packaging-Systems.html
相關下載:
LV003Lentivirus2ndPackagingSystem操作手冊
LV003Lentivirus2ndPackagingSystem產品操作手冊
Lentivirus感染操作手冊
特點
Lentivirus慢病毒系列商品:
Lentivirus慢病毒低速純化(純化) | Lentivirus慢病毒高濃度純化(純化) | Lentivirus病毒RT-QPCR定量(定量) | Lentivirus病毒定量快篩片(定量卡)
改良式 病毒包裝系統|讓病毒表現最佳化
慢病毒(Lentivirus)的結構可分成套膜(envelop)、蛋白質膜(capsid)、以及遺傳物質,Lentivirus感染宿主後,會將其基因嵌入宿主細胞使其表達。
對於慢病毒顆粒(lentiviralparticles)的生產,通常需要三種組分:1.包含您感興趣的插入物(cDNA,shRNA或miRNA)的慢病毒載體(lentiviralvector)。
2.包裝含有所有必需的病毒結構蛋白(viralstructureproteins)的載體。
3.包膜載體(envelopevector)表達水泡性口炎病毒(VesicularStomatitisVirus,VSV)糖蛋白(G)。
lentivirus已可藉由 a.帶有targetgene的lentivector,加上 b.packagingsystem,構成無致病性的psuedovirus。
通常,具有wild-type慢病毒載體5’LTR需要第二代包裝系統,因為這些載體需要TAT激活(activation)。
然而,第3代慢病毒表達載體( 2ndGenerationPackagingMix)也將支持包裝具有嵌合5’LTR的第3代慢病毒表達載體(3rdgenerationlentiviralexpressionvectors)。
所有的慢病毒表達由abm銷售的載體是第3代,其上游具有嵌合RSV啟動子5’LTR。
ABMPackagingSystem調配成最佳比例(0.5ug/ul),只需要直接和病毒基因載體同時轉染至細胞中,即可進行病毒的製作。
在200ul體積中有100ugDNA(100µgmixtureofpLenti-P2AandpLenti-P2B)。
每個反應使用10ugDNA,因此每瓶包裝混合物總共有10個反應。
LentivirusPackagingSystems病毒包裝系統
Packagingsystem由數個plasmid組成,含有構成病毒套膜VSV-G、病毒結構蛋白gag/pol、rev等序列。
兩代Lenti-PackagingMix都含有病毒結構蛋白gag/pol,rev和病毒套膜VSVG基因。
不同之處在於排列( arrangements)。
第2代(貨號LV003)含有一個編碼gag/pol和rev基因 plasmid和一個編碼VSVG基因 plasmid。
第3代(貨號LV053)包含一個用於gag/pol plasmid,一個用於rev plasmid和一個用於VSVG plasmid,用於最大安全性(safetyfeature)。
所有的Lenti-Packaging混合物都經過測試,可與OpenBiosystems和Invitrogen系統兼容。
2ndGeneration:由兩條packagingplasmid組成。
一般而言,需要TAT的活化才能進行病毒生成。
3rdGeneration:將packagingplasmid分成三條,且不需TAT輔助即可生成病毒。
Product
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Quantity
Cat.#
3rdGenerationPackagingSystemMix
pLenti-P3A
pLenti-P3B
pLenti-P3C
N/A
200ul
LV053
3rdGenerationPackagingMix
&LentifectinComboPack
pLenti-P3A
pLenti-P3B
pLenti-P3C
N/A
Kit
LV053-G074
GFPControlLentivirus
pLenti-GFP
Neomycin
10ml
LV006
β-GalControlLentivirus
MapUnavailable
Neomycin
10ml
LV007
2ndGenerationPackagingSystemMix
pLenti-P2A
pLenti-P2B
N/A
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LV003
2ndGenerationPackagingMix
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pLenti-P2A
pLenti-P2B
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