Acibenzolar-S-methyl防治不結球白菜病害之應用與可能抗病 ...

... 防禦反應而達到防治病害之效，此現象稱為誘導性抗病(induced resistance)。

... 於種子浸泡ASM 防治不結球白菜苗立枯病之試驗中，僅有以10 mg/L ASM 處理三鳳2號 ... 資料載入處理中... 跳到主要內容 臺灣博碩士論文加值系統 ::: 網站導覽| 首頁| 關於本站| 聯絡我們| 國圖首頁| 常見問題| 操作說明 English |FB專頁 |Mobile 免費會員 登入| 註冊 功能切換導覽列 (165.22.106.144)您好！臺灣時間：2022/10/2203:57 字體大小：       ::: 詳目顯示 recordfocus 第1筆/ 共1筆  /1頁 論文基本資料 摘要 外文摘要 目次 參考文獻 紙本論文 QRCode 本論文永久網址: 複製永久網址Twitter研究生:許翠蘭研究生(外文):Tsui-LanHsu論文名稱:Acibenzolar-S-methyl防治不結球白菜病害之應用與可能抗病機制之探討論文名稱(外文):Applicationofacibenzolar-S-methylanditsresistancemechanismincontrollingdiseasesofPak-choi指導教授:鍾文鑫口試委員:鍾文全、張碧芳口試日期:2011-07-13學位類別:碩士校院名稱:國立中興大學系所名稱:植物病理學系所學門:農業科學學門學類:植物保護學類論文種類:學術論文論文出版年:2011畢業學年度:99語文別:中文論文頁數:63中文關鍵詞:acibenzolar-S-methyl(ASM)、不結球白菜、誘導性抗病、藥害、機制外文關鍵詞:acibenzolar-S-methyl(ASM)、Pak-choi、inducedresistance、phytotoxicity、mechanism相關次數: 被引用:1點閱:408評分:下載:0書目收藏:0 Acibenzolar-S-methyl(ASM)係苯并噻二唑(benzothiadiazole)的衍生物，其透過植物體內的水楊酸訊號傳遞路徑，誘導植物產生防禦反應而達到防治病害之效，此現象稱為誘導性抗病(inducedresistance)。

本研究目的為探討ASM應用在不結球白菜上是否會造成生理傷害、能否防治不結球白菜炭疽病(anthracnose)和苗立枯病(damping-off)、及ASM誘導抗病之可能作用機制。

以葉面噴灑和種子浸泡2種方式處理1、10和100mg/LASM，觀察對王冠和三鳳2號品種的生長影響。

結果顯示施用高濃度(100mg/L)ASM時會引起植株鮮重減少、矮化或葉片畸形等藥害(phytotoxicity)；而種子方面，浸泡高濃度ASM的時間越久，則越容易引起種子發芽率降低或幼苗生長勢較差等徵狀。

在防治炭疽病試驗中，於接種病原菌前預先處理1和10mg/LASM，經統計分析其罹病度後得知，於接種前1天施用1與10mg/LASM之防治效果可達80%以上，而接種前4天內皆為有效防治之施藥時間點，防治效果可超過50%，其中預先處理10mg/LASM之防治效果與百克敏和亞托敏的防治效果相同。

於種子浸泡ASM防治不結球白菜苗立枯病之試驗中，僅有以10mg/LASM處理三鳳2號品種種子18小時以上能防治立枯病，然此種處理條件亦會對幼苗生長造成影響，對植株生長影響甚大，顯示ASM適合以種子浸泡之方式處理不結球白菜。

本試驗分析不結球白菜抗病相關之酵素，結果得知王冠品種之超氧化物歧化酶(superoxidasedismutase,SOD)活性於處理1mg/LASM後24小時達最高，而三鳳2號品種之SOD活性於處理10mg/LASM後24小時達最高；而接種炭疽病菌後，王冠品種的活性皆明顯高於對照組，三鳳2號品種的活性則於12小時後明顯高於對照組0.7倍。

然於接種前3小時施用1與10mg/LASM之王冠品種於6小時起SOD活性開始上升，在24小時後活性增加0.5與0.7倍；三鳳2號品種分別預處理1與10mg/LASM之後的SOD活性於3和6小時後開始明顯增加，24小時後活性增加0.3與0.4倍。

於過氧化氫酶(catalase,CAT)之活性測定，顯示處理10mg/LASM的王冠品種於6小時活性會降低0.6倍，但隨後又回復至與對照組無明顯差異，然三鳳2號品種於施用各處理所測得之CAT活性皆無明顯差異。

另王冠品種於接種病原菌後3與18小時，CAT活性明顯降低0.8與0.5倍；而三鳳2號品種則於接種後6小時，活性明顯減少0.8倍。

若接種前3小時預處理10mg/LASM之王冠品種，CAT活性於6小時後明顯降低0.8倍，而三鳳2號品種預處理1mg/LASM之活性，於12小時後明顯降低0.7倍。

過氧化酵素(peroxidase,POD)活性測定指出，處理1mg/LASM後王冠品種之POD於第5天活性增加達1.4倍，處理10與100mg/LASM後POD於第4天活性達到最高，分別較對照組增加1.9與4.2倍；三鳳2號品種處理1與10mg/LASM後之POD活性於1天後開始增加，而100mg/LASM處理之植株於4天後開始增加，且所有處理組之活性皆可持續至第7天，活性分別較對照組增加0.5、1.0、0.9倍。

此兩種品種接種病原菌後，王冠品種的POD活性於1天後開始上升，於第6天時明顯增加0.9倍；而三鳳2號品種之活性則於第6天才明顯增加0.3倍。

王冠品種預處理1mg/LASM之POD活性於3天後開始顯著增加，第6天明顯增加達0.7倍；而預處理10mg/LASM之活性於3小時內立刻被活化，於第3天明顯增加達0.6倍；另預處理100mg/LASM之活性於1天起顯著增加，則於第5天明顯增加達1.7倍。

三鳳2號品種預處理1mg/LASM之POD活性與對照組無明顯差異；而預處理10mg/LASM後之活性於第3天明顯增加0.7倍；另預處理100mg/LASM植株之POD活性於第6天後明顯增加0.4倍。

於苯丙胺酸氨裂解酵素(phenylalanineammonialyase,PAL)之活性測定，結果顯示王冠品種處理1與10mg/LASM後，PAL活性於第3天明顯增加0.1與0.2倍；100mg/LASM處理之植株體內活性於5天後明顯增加，於第7天活性增加達0.2倍。

而三鳳2號品種施用1、10、100mg/LASM後7天，PAL活性分別明顯增加0.4、0.4、0.6倍。

於接種病原菌後，王冠品種於6天後，PAL活性明顯增加0.2倍；而三鳳2號品種的活性無任何改變。

此外，王冠品種在接種前預先處理1mg/LASM之PAL活性無任何改變，而預處理10與100mg/LASM後，PAL活性於第6天皆明顯增加0.2倍。

三鳳2號品種預處理1mg/LASM後PAL活性無任何改變，而預處理10mg/LASM植株的活性，則於6天後明顯增加0.3倍；另預處理100mg/LASM後的PAL活性於3小時與第4天顯著增加0.4與0.2倍。

前人研究指出，植物抗病性的產生除上述與抗病有關酵素外，亦包含病程相關蛋白質(pathogenesis-relatedproteins,PRprotein)和總酚化物(totalphenoliccompounds)等，未來將進一步分析其他與抗病性產生有關之機制。

Acibenzolar-S-methyl(ASM)isoneofthederivativesofbenzothiadiazole.Itcaninduceplantdefenseresponsestocontroldiseasesbysalicylicacidsignalingpathway.Thus,ASMcanbeanalternativecontrolagentinprotectingcrops.Inthisstudy,theobjectivesare1)estimationofphytotoxicitycausedbyASMonPak-choi(BrassicacampestrisL.ChineseGroup),2)efficacyofcontrollinganthracnoseanddamping-offofPak-choi,3)possibilityofresistantmechanismsinducingbyASMinPak-choi.Basedonleafsprayingandseedsoaking,twoPak-choicultivarsofWangGuanandSanFengNo.2weretreatedwith1,10,and100mg/LASM,respectively.TheleafsprayingresultsindicatedthatPak-choicouldshowesomeabnormalsymptomscausedby100mg/LASM,includingfreshweightreduction,dwarfordeformationofleaveshape.Forseedtreatment,therateofseedgerminationwerereduced,orevengerminationtheseedlingdidnotshowhealthyunder10or100mg/LASM.Comparingtheefficacyoftwocultivarspre-treatedwith1and10mg/LASM1dayor4daybeforeinoculated105conidia/mlC.higginsianumPA01couldinduceresistanceandreducemorethan80%or50%diseaseseverity,respectively.Consequently,thetwocultivarspre-treatedwith10mg/LASMshowedsameefficacyastreatedfungicidesofpyraclostrobinandazoxystrobin.Theotherside,onlySanFengNo.2cultivarshowedgoodefficacytoagaintdamping-offcausedbyRhizoctoniasolaniwhentheseedssoakedwith10mg/LASMfor18hrs.However,theseedingsoftwocultivarsshowedabnormalsymptomsaftertreatedwith10mg/LASM.Thus,seedtreatmentmightnotgoodmethodforcontrollingdamping-off.ForcarringouttheresistancemechanismofPak-choi,severalenzymescorrespondedwithcropsresistancewereanalyzed,includingsuperoxidasedismutase(SOD),catalase(CAT),peroxidase(POD)andphenylalanineammonialyase(PAL).TheactivityofSODinWangGuancultivarwashighestat24hrsaftertreatedwith1mg/LASM,however,theactivityofSODinSanFengNo.2cultivarwashighestat24hrsaftertreatedwith10mg/LASM.TheactivitiesofSODinWangGuancultivarwere0.6~0.8timeshigh;meanwhile,theactivityofSODinSanFengNo.2cultivarwas0.7timeshighat12hrsafterinoculatedwithC.higginsianumPA01.TheactivitiesofSODinWangGuancultivarwere0.7and0.5timeshighat24hrs,andtheactivitiesofSODinSanFengNo.2cultivarwere0.3and0.4highat24hrsafterpre-treatedwith1and10mg/LASM.IntheactivityofCAT,theWangGuancultivarwasreduced0.6timeshighat6hrsaftertreated10mg/LASMandsubsequentlyreturnedtonormallevel.Moreover,theactivityofCATinSanFengNo.2cultivardidnotshowsignificantdifferenceaftertreatedwithASM.Afterinoculation,theactivitiesofCATinWangGuancultivarwerereduced0.8and0.5timesat3and18hrsandtheactivityofCATinSanFengNo.2cultivarwasreduced0.8timesat6hrs.Theotherside,theactivityofCATinWangGuancultivarwasreduced0.8timesat6hrsafterpre-treatedwith10mg/LASM,however,theactivityofCATinSanFengNo.2cultivarwasreduced0.7timesat12hrsafterpre-treatedwith1mg/LASM.ThePODtestindicatedthattheactivityofPODinWangGuancultivarwasincreasedaround1.4timeshighat5daysaftertreated1mg/LASM,andthePODactivitieswere1.9and4.2timeshighat4daysaftertreated10and100mg/LASM,respectively.Meanwhile,theactivityofPODinSanFengNo.2cultivarwasincreasedat1dayaftertreatedwith1and10mg/L,andtheactivityincreasedat4daysafterwith100mg/L.Inthistest,theactivitiesofPODinthetwocultivarswereinducedandtheactivitiescouldbepersistedfor7days.ComparingthePODactivitieswithoutinoculation,thePODactivitiesinWangGuancultivarandSanFengNo.2cultivarwereincreased0.9and0.3timesat6daysafterinoculation.Moreover,thePODactivitiesofWangGuancultivarwerehighestat6days,3daysand5daysafterpre-treatedwith1,10,and100mg/LASM,respectively.However,theactivityofPODinSanFengNo.2cultivardidnotshowsignificantdifferenceafterpre-treatedwith1mg/LASM.TheactivityofPODinSanFengNo.2cultivarwasincreased0.7timesat3daysafterpre-treatedwith10mg/LASM,andtheactivityofPODinSanFengNo.2cultivarwasincreased0.4timesat6daysafterpre-treatedwith100mg/LASM.FortheactivityofPALinPak-choi,theWangGuancultivarwasincreasedsignificantly0.1and0.2timeshighat3daysaftertreatedwith1and10mg/LASM,andthePALactivitywasincreasedsignificantlyat5daysandincreased0.2timeshighat7daysaftertreatedwith100mg/LASM.Theothersides,theactivitiesofPALinSanFengNo.2wereincreased0.4,0.4,and0.6timeshighat7daysaftertreatedwith1,10,and100mg/LASM,respectively.TheactivityofPALinWangGuancultivarwasincreased0.2timesat6days,however,theactivityofPALinSanFengNo.2cultivardidnotshowsignificantdifferenceafterinoculating.TheactivityofPALinWangGuancultivardidnotshowsignificantdifferenceafterpre-treatedwith1mg/LASM,however,theactivitiesofPALinWangGuancultivarwerebothincreased0.2timesat6daysafterpre-treatedwith10and100mg/LASM.TheactivityofPALinSanFengNo.2cultivardidnotshowsignificantdifferenceafterpre-treatedwith1mg/LASM,however,theactivityofPALinSanFengNo.2cultivarwasincreased0.3timesat6daysafterpre-treatedwith10mg/LASM.Moreover,theactivitiesofPALinSanFengNo.2wereincreased0.4and0.2timesat3hrsand4daysafterpre-treatedwith100mg/LASM.Inthisstudy,theotherdefenseresponsesofcropswerenotexamined,includingpathogenesis-related(PR)proteinsorcontentoftotalphenoliccompounds.Theseresistancemechanismswillbecarriedoutinfuture. 中文摘要i英文摘要iv目次vii前言1材料與方法4一、供試植物4二、供試菌株4三、Acibenzolar-S-methyl(ASM)配製4四、ASM對病原菌菌絲生長之影響4五、ASM對不結球白菜生長與發芽之影響5六、ASM防治不結球白菜炭疽病之應用5(一)白菜炭疽病接種源之製備與接種5(二)防治不結球白菜炭疽病之溫室試驗評估61.ASM防治白菜炭疽病之評估62.ASM與不同作用機制之殺菌劑防治白菜炭疽病之比較6七、ASM防治不結球白菜幼苗立枯病之應用6(一)白菜幼苗立枯病接種源之製備6(二)浸泡ASM對防治不結球白菜幼苗立枯病之評估7八、酵素活性測定7(一)酵素測定材料取樣7(二)超氧化物歧化酶(superoxidasedismutase,SOD)之活性測定8(三)過氧化氫酶(catalase,CAT)之活性測定8(四)過氧化酵素(peroxidase,POD)之活性測定9(五)苯丙胺酸氨裂解酵素(phenylalanineammonialyase,PAL)之活性測定9九、統計分析10結果11一、ASM對病原菌菌絲生長之影響11二、施用ASM對不結球白菜生長之影響11三、防治不結球白菜炭疽病之溫室試驗評估12(一)ASM防治白菜炭疽病之評估12(二)比較ASM與不同作用機制之殺菌劑防治白菜炭疽病的效果13三、ASM防治不結球白菜幼苗立枯病之應用13四、酵素活性測定14(一)超氧化物歧化酶(superoxidasedismutase,SOD)之活性測定14(二)過氧化氫酶(catalase,CAT)之活性測定14(三)過氧化酵素(peroxidase,POD)之活性測定15(四)苯丙胺酸氨裂解酵素(phenylalanineammonialyase,PAL)之活性測定16討論18參考文獻23表目次表一、不同濃度ASM對ColletotrichumhigginsianumPA01與RhizoctoniasolaniN-1菌絲生長之影響28表二、施用不同濃度與次數之ASM對王冠與三鳳2號品種之生長影響29表三、浸泡不同濃度ASM與不同時間浸泡對王冠和三鳳2號種子發芽率之影響30表四、不同時間下預先處理不同濃度ASM對王冠與三鳳2號炭疽病之防治效果31表五、比較ASM與其他殺菌劑對不結球白菜炭疽病之防治效果32表六、王冠和三鳳2號種子以不同濃度ASM浸泡不同時間後對幼苗立枯病之防治效果33表七、王冠和三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，24小時內之超氧化物歧化酶(superoxidasedismutase,SOD)活性的變化34表八、王冠與三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，再接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，24小時內之超氧化物歧化酶(SOD)活性的變化35表九、王冠與三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，24小時內之過氧化氫酶(catalase,CAT)活性的變化36表十、王冠與三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，再接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，24小時內之過氧化氫酶(CAT)活性的變化37表十一、王冠與三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，7天內之過氧化酵素(peroxidase,POD)活性的變化38表十二、王冠與三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，再接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，6天內之過氧化酵素(POD)活性的變化39表十三、王冠與三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，7天內之苯丙胺酸氨裂解酵素(phenylalanineammonialyase,PAL)活性的變化40表十四、王冠與三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，再接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，6天內之苯丙胺酸氨裂解酵素(PAL)活性的變化41圖目次圖一、施用100mg/LASM對不結球白菜植株外觀之影響。

(A)王冠品種(B)三鳳2號品種。

42圖二、處理100mg/LASM對不結球白菜幼苗外觀之影響。

(A)王冠品種對照組(B)王冠品種處理組(C)三鳳2號品種對照組(D)三鳳2號品種處理組。

43圖三、王冠品種植株處理不同濃度ASM後，24小時內之超氧化物歧化酶(SOD)活性的變化。

44圖四、三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，24小時內之超氧化物歧化酶(SOD)活性的變化。

45圖五、王冠與三鳳2號品種植株接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，24小時內之超氧化物歧化酶(SOD)活性的變化。

46圖六、王冠品種植株處理不同濃度ASM後，再接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，24小時內之超氧化物歧化酶(SOD)活性的變化。

47圖七、三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，再接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，24小時內之超氧化物歧化酶(SOD)活性的變化。

48圖八、王冠品種植株處理不同濃度ASM後，24小時內之過氧化氫酶(CAT)活性的變化。

49圖九、三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，24小時內之過氧化氫酶(CAT)活性的變化。

50圖十、王冠與三鳳2號品種植株接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，24小時內之過氧化氫酶(CAT)活性的變化。

51圖十一、王冠品種植株處理不同濃度ASM後，再接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，24小時內之過氧化氫酶(CAT)活性的變化。

52圖十二、三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，再接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，24小時內之過氧化氫酶(CAT)活性的變化。

53圖十三、王冠品種植株處理不同濃度ASM後，7天內之過氧化酵素(POD)活性的變化。

54圖十四、三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，7天內之過氧化酵素(POD)活性的變化。

55圖十五、王冠與三鳳2號品種植株接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，6天內之過氧化酵素(POD)活性的變化。

56圖十六、王冠品種植株處理不同濃度ASM後，再接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，6天內之過氧化酵素(POD)活性的變化。

57圖十七、三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，再接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，6天內之過氧化酵素(POD)活性的變化。

58圖十八、王冠品種植株處理不同濃度ASM後，7天內之苯丙胺酸氨裂解酵素(PAL)活性的變化。

59圖十九、三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，7天內之苯丙胺酸氨裂解酵素(PAL)活性的變化。

60圖二十、王冠與三鳳2號品種植株接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，6天內之苯丙胺酸氨裂解酵素(PAL)活性的變化。

61圖二十一、王冠品種植株處理不同濃度ASM後，再接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，6天內之苯丙胺酸氨裂解酵素(PAL)活性的變化。

62圖二十二、三鳳2號品種植株處理不同濃度ASM後，再接種炭疽病菌C.higginsianumPA01，6天內之苯丙胺酸氨裂解酵素(PAL)活性的變化。

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