mini質體DNA萃取套組試劑盒| Plasmid miniPREP Kit 貨號 ...
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PureDireX質粒小量製備試劑盒(Plasmid miniPREP Kit ) 貨號PDP01-0100 小量質體DNA (plasmid DNA) 製備試劑盒提供了一種快速,簡單,且成本有效地用於從培養的革蘭氏 ...
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mini質體DNA萃取套組試劑盒|PlasmidminiPREPKit貨號PDP01-0100
代理廠牌:
原廠連結:
http://bio-helix.com
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小量質體DNA萃取套組miniPREP試劑盒操作手冊
特點
mini質體DNA萃取套組試劑盒|PlasmidminiPREP Kit 貨號PDP01-0100
PureDireX質粒小量製備試劑盒(PlasmidminiPREP Kit )貨號PDP01-0100
小量質體DNA(plasmidDNA)製備試劑盒提供了一種快速,簡單,且成本有效地用於從培養的革蘭氏陽性(Grampositive)和革蘭氏陰性細菌細胞(Gramnegativebacterialcells)分離質體DNA(plasmidDNA)的方法。
該設計基於細菌細胞的鹼裂解(alkalinelysis),然後在存在高濃度鹽的情況下將DNA結合到離心柱(spincolumn)的玻璃纖維基質(glassfibermatrix)上。
使用該試劑盒純化的質體DNA(plasmidDNA)適用於各種常規應用,包括限制性內切酶消化(restrictionenzymedigestion)、測序(sequencing)、文庫篩選(libraryscreening)、體外轉譯 (invitro translation)、細胞轉染(transfection)、連接(ligation)和轉化(transformation)。
整個過程可以在15-20分鐘內完成。
最快的程序: 在15-20分鐘內完成
樣品: 最多4ml細菌細胞
產量: 最多30μg質粒
Note:PureDireX/PurificationKits/ExtractionKit/PlasmidDNA
Categories: PlasmidDNAPurificationSystem
PlasmidminiPREPKit
ProtocolStep1BacterialCellsHarvesting
1.Transfer1.5mlbacterialculturetoamicrocentrifugetube.
2.Centrifugeat14,000xgfor1minuteanddiscardthesupernatant.
Step2Resuspend
1.Resuspendpelletedbacterialcellsin200μloftheBufferS1(RNaseAadded).
Step3Lysis
1.Add200μloftheBufferS2andmixthoroughlybyinvertingthetube10times(donotvortex)andthenstandattheroomtemperaturefor2minutesoruntilthelysateishomologous.
Step4Neutralization1.Add300μloftheBufferS3andmiximmediatelyandthoroughlybyinvertingthetube10times(Donotvortex).2.Centrifugeat14,000xgfor3minutes.
Step5Binding1.PlaceaPMcolumninaCollectionTube.Applythesupernatant(fromstep4)tothePMcolumnbydecantingorpipetting.2.Centrifugeat14,000xgfor30seconds,thendiscardtheflow-through,andplacethePMcolumnbackintothesamecollectiontube.
Step6Wash1.Add400μloftheBufferW1intothePMcolumn.2.Centrifugeat14,000xgfor30seconds.3.Discardtheflow-throughandplacethePMcolumnbackintothesamecollectiontube.4.Add600μloftheBufferW2(Ethanoladded)intothePMcolumn.5.Centrifugeat14,000xgfor30seconds.6.Discardtheflow-throughandplacethePMcolumnbackintothesamecollectiontube.7.Centrifugeat14,000xgagainfor2minutestoremovetheresidualBufferW2. Step7Elution1.ToeluteDNA,placethePMcolumninaclean1.5mlmicrocentrifugetube.2.Add50~200μloftheBufferEorH2O(pHbetween7.0and8.5)tothecenterofeachPMcolumn,letitstandfor2minutes,andcentrifugeat14,000xgfor2minutes.*Checkthebuffersbeforeuseforsaltprecipitation.Redissolveanyprecipitatebywarmingto37°C.
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