Plasmid extraction | 質體介紹- ACE Biolabs

Plasmid extraction | 質體介紹 質體(Plasmid)是獨立於宿主染色體DNA的環狀DNA片段， ... 驅動目標基因的轉錄，表達載體的重要組成成分，確認基因於不同細胞類型中表達 ... 首頁 GeneCloning Plasmidextraction|質體介紹2020/06/03 Plasmidextraction|質體介紹   質體(Plasmid)是獨立於宿主染色體DNA的環狀DNA片段，它們主要存在於細菌中，也自然存在於古細菌和真核生物中，例如酵母菌或是植物，質體向宿主提供一種或是多種功能，有益於宿主，例如對於抗生素的抗性，降解功能或是些許毒性。

  (Addgene)   所有天然的質體均包含複製起點(OriginofReplication)(控制質體宿主範圍及拷貝數CopyNumber)，以及有利於存活的基因如抗生素抗性基因(Resistantgene)，實驗室使用的質體通常是人工產生，將外源DNA導入細菌當中產生，人工質體具有複製起點(Ori)、選擇標記物(如螢光基因、抗性基因)及克隆位點(CloningSite)，科學家利用這些特性，修飾質體自我複製的能力，使質體成為生命科學不可或缺的工具之一。

  質體包含DNA片段內容 質體內容 於質體內用途 OriginofReplication(ORI) DNA序列藉著啟動轉錄蛋白，啟動質體的複製 AntibioticResistanceGene 可藉由抗生素基因篩選具有抗性基因的質體 MultipleCloningSite(MCS) 短片段DNA包含多個限制酶位點，可插入DNA(insertGene)，於表達質體中，MCS通常位於啟動子下游 Insert 目標基因、啟動子或是其它DNA片段被克隆至MCS中進行進一步研究 PromoterRegion 驅動目標基因的轉錄，表達載體的重要組成成分，確認基因於不同細胞類型中表達以及可獲得重組蛋白的量 SelectableMarker 抗生素抗性基因於細菌中進行選擇，許多質體也具有用於其它細胞類型的抗性基因選擇標記 PrimerBindingSite 短鏈單股DNA序列，用於PCR擴增或測定序起始點，飲物可用於質體的序列驗證     質體複製起點及拷貝數   DNAconstruct(Plasmids) 複製起點(OriginofReplication) 拷貝數(Copynumber) 分類 pUCvectors pMB1* 500–700 highcopy pBluescript®vectors ColE1 300–500 highcopy pGEM®vectors pMB1* 300–400 highcopy pTZvectors pMB1* >1000 highcopy pBR322andderivatives pMB1* 15–20 lowcopy pACYCandderivatives p15A 10–12 lowcopy pSC101andderivatives pSC101 ~5 verylowcopy             抗生素使用條件及儲存建議   抗生素 建議儲存濃度 建議使用濃度 Ampicillin 100mg/mL 100µg/mL Carbenicillin 100mg/mL 100µg/mL Chloramphenicol 25mg/mL(dissolveinEtOH) 25µg/mL HygromycinB 200mg/mL 200µg/mL Kanamycin 50mg/mL 50µg/mL Spectinomycin 50mg/mL 50µg/mL Tetracycline 10mg/mL 10µg/mL   上述三個表格分別為質體內容，以及不同的複製起點，因應不同的拷貝數，準備相同質體數量情況下，需要增加細菌製備，表三是細菌以及細胞使用抗生素使用濃度及儲存建議，ACEBiolabs也提供相關抗生素化學藥品     ACEBiolabsAntibioticsCatalog#NameAN0001ChloramphenicolAN0002G418DisulfateSaltAN0003PenicillinGsodiumsaltAN0004TetracyclineAN0005KanamycinSulfateAN0006StreptomycinsulfateAN0007BlasticidinShydrochlorideAN0008Puromycindihydrochloride,cellculturetestedAN0010AmpicillinsodiumsaltAN0016Ampicillin 目錄 客製化服務 產品 聯絡我們0 線上客服 詢價