基因文庫- 維基百科，自由的百科全書

把某種生物的基因組的全部遺傳信息（DNA）切成適當長度的片段，並分別與載體結合，導入微生物細胞，形成克隆。

包含基因組中所有DNA序列的克隆的集合，稱為基因組文庫（英語 ... 基因文庫 維基百科，自由的百科全書 跳至導覽 跳至搜尋 在分子生物學中,一個基因文庫是通過分子克隆的方法存儲和繁殖微生物群的DNA片段的集合。

基因文庫有很多種，包括部分基因文庫（cDNA文庫）、基因組文庫（由基因組DNA形成），以及隨機突變體庫（由被替代的核苷酸或密碼子結合形成的新的基因合成）。

基因文庫是當前分子生物學的一個主要研究方向，這些文庫的用途取決於原始DNA片段的來源。

用於文庫製備的克隆載體和技術存在差異，但通常每個DNA片段都被獨立地插入一個克隆載體，然後將重組DNA分子轉化入受體菌群（細菌人工染色體，BAC文庫）或酵母內，使得每個生物體平均含有一個構建的表達載體（載體+插入物）。

隨著培養的種群的數量增長，其中包含的DNA也在被不斷複製。

目次 1術語 1.1部分基因文庫 1.2基因組文庫 2構建 2.1克隆載體 2.2基因組文庫的構建 2.3cDNA文庫的構建 3參考文獻 術語[編輯] 術語「文庫」可以指生物群（每個生物攜帶插入克隆載體中的DNA分子），或者指所有克隆的載體分子的集合。

部分基因文庫[編輯] 主條目：cDNA文庫 部分基因文庫（英語：cDNAlibrary）是以從特定來源（細胞集合，特定組織或整個生物體）純化的mRNA樣品為模板，使用逆轉錄酶形成的互補DNA與適當的載體連接後轉化到受體菌形成的重組菌群。

因此，它一定程度上反映了來源細胞在純化mRNA時的生理環境下活躍轉錄的基因。

cDNA文庫可用於反向遺傳學，但它們僅代表給定生物體基因組的非常小（小於1％）的一部分。

cDNA文庫的應用包括： 發現新基因 克隆全長cDNA分子用於體外基因功能研究 研究在不同細胞或組織中表達的mRNA 研究不同細胞或組織中的選擇性剪接 基因組文庫[編輯] 主條目：基因組文庫 把某種生物的基因組的全部遺傳信息（DNA）切成適當長度的片段，並分別與載體結合，導入微生物細胞，形成克隆。

包含基因組中所有DNA序列的克隆的集合，稱為基因組文庫（英語：Genomiclibrary）。

[1] 基因組文庫的應用包括： 確定給定生物的完整基因組序列（參見基因組計劃） 作為通過基因工程產生轉基因動物的基因組序列的來源 體外調控序列功能的研究 癌組織中基因突變的研究 構建[編輯] 克隆載體[編輯] 克隆載體（英語：Cloningvector）是取自病毒，質粒或高等生物的細胞的一小段DNA，可以在生物體中穩定存在，並可以插入外源DNA片段用於克隆目的。

[2]因此，載體有易將DNA片段插入載體或從載體中除去的特徵，例如通過用切割DNA的限制酶處理載體和外源DNA。

由此產生的DNA片段含有平末端或粘性末端，然後通過分子連接將載體DNA和具有相容末端的外源DNA連接在一起。

在將DNA片段克隆到克隆載體中後，可以將其進一步亞克隆到另一種用於更具體用途的載體中。

構建基因文庫常常使用的載體有λ噬菌體，cosmid載體，質粒和人工染色體（包括酵母人工染色體YAC、細菌人工染色體BAC、P1派生人工染色體PAC等）。

載體最常在細菌細胞中繁殖，但如果使用YAC（酵母人工染色體）作為載體，則可以在酵母細胞中繁殖。

載體也可以在病毒中繁殖，但這可能是耗時且繁瑣的。

但通過使用病毒（通常是噬菌體）實現的高轉化效率使得它們可用於包裝載體，然後將其導入細菌（或酵母）細胞中。

基因組文庫的構建[編輯] 載體DNA片段的製備：使用限制性核酸內切酶對載體DNA分子進行剪切，使之成為線狀DNA。

供體DNA片段的製備：對生物體總DNA分離純化，並使用機械剪切法或酶切法分離出特定大小的DNA片段。

供體與載體DNA的連接：使用DNA連接酶將供體與載體連接成為重組DNA分子。

重組DNA分子的轉化：將重組DNA分子轉化進入受體細胞。

篩選與保存[1] cDNA文庫的構建[編輯] 載體DNA片段的製備 多聚RNA的分離與純化 雙鏈cDNA的合成 第一條cDNA鏈：逆轉錄法 第二條cDNA鏈：鹼解或酶解法除去RNA分子 cDNA與載體DNA相連 重組cDNA分子的轉移[1] 參考文獻[編輯] ^1.01.11.2基因组DNA文库(Genomiclibrary)构建(PDF).[2018-08-29].（原始內容存檔(PDF)於2018-08-29）.  ^Definitionofcloningvector.GenomeDictionary.[2012-10-18].（原始內容存檔於2010-02-24）（英語）.  取自「https://zh.wikipedia.org/w/index.php?title=基因文库&oldid=63836007」 分類：基因工程分子生物學隱藏分類：CS1英語來源(en)含有英語的條目 導覽選單 個人工具 沒有登入討論貢獻建立帳號登入 命名空間 條目討論 臺灣正體 已展開 已摺疊 不转换简体繁體大陆简体香港繁體澳門繁體大马简体新加坡简体臺灣正體 查看 閱讀編輯檢視歷史 更多 已展開 已摺疊 搜尋 導航 首頁分類索引特色內容新聞動態近期變更隨機條目資助維基百科 說明 說明維基社群方針與指引互助客棧知識問答字詞轉換IRC即時聊天聯絡我們關於維基百科 工具 連結至此的頁面相關變更上傳檔案特殊頁面靜態連結頁面資訊引用此頁面維基數據項目 列印/匯出 下載為PDF可列印版 其他語言 CatalàEnglishEspañolItalianoPolskiPortuguêsУкраїнська 編輯連結