第三次作業

1. 反轉錄病毒載體： 是目前使用最多的，它是一種RNA病毒，可經由反轉錄酉每形成雙股DNA，反轉錄病毒進入宿主細胞 ...       第三次作業 什麼是載體？ 　　在遺傳工程中，一種能攜帶外源基因或修飾後基因的DNA載具，常用的有病毒DNA或細菌的質體。

比如說，我們將一種外來的DNA插入載體後，可將其導入細菌或其他細胞中，以研究外來基因的表現。

以下為現在主要作為載體的病毒載體和非病毒載體。

病毒載體： 　　生物的特性是存在染色體的基因裡，染色體是以去氧核糖核酸（DNA）為主組成（病毒是以RNA或DNA組成遺傳物質）。

由於基因研究的發達，已經了解許多特性的基因，這樣利用限制脢（一類可切核酸的酵素）將特定的基因切下，再利用標示基因（如抗藥性基因）的加入，這樣便能在微生物（如大腸桿菌）中大量繁殖這段特性的基因，然後再應用標示基因的存在，便能選取我們所選定大量繁殖的特性基因。

主要有反轉錄病毒載體（Retroviralvector）、腺病毒載體（Adenoviralvector）、腺病毒關連載體（Adeno-associatedviralvector）及?疹病毒（Herpessimplexvirus,HSV）等。

其優點是轉殖效率佳，但具潛在性的危險性。

1.反轉錄病毒載體： 　　是目前使用最多的，它是一種RNA病毒，可經由反轉錄酉每形成雙股DNA，反轉錄病毒進入宿主細胞後會插入宿主染色體中，達到基因轉殖與基因表現的目的。

不過病毒插入宿主染色體是隨機的，我們無法預測插入的位置，所以可能會使原本有功能的基因失去活性或使染色體發生變異。

反轉錄病毒(retrovirus)也可以用作傳遞外來基因至真核細胞的媒介。

反轉錄病毒含有一個RNA分子，後者的5’端有甲基化的頂蓋(methlatedcap)，而3’端有聚A的長尾(poly-Atail)，如mRNA。

在感染細胞時，病毒的RNA反轉錄為雙股DNA，此DNA再插入細胞的基因內。

於插入後，此種先驅病毒(provirus；即併入之病毒DNA)猶如細胞的基因維持在細胞的染色體上。

合併於細胞染色體中的前驅病毒，其兩端有相同的longterminalrepeat(LTR)序列，促使病毒基因表現的唯一啟動子(promoter)便在LTR中。

而製造各種病毒蛋白質的RNA，會經過RNA接合(RNAsplicing)的控制。

前驅病毒的DNA，如果經外來DNA序列局部的置換，可用作傳遞基因至動物細胞的工具。

受這種重組DNA轉殖的細胞，能夠在LTR序列開始轉錄而產生大量新的mRNA。

2.腺病毒載體： 　　是利用同源基因重組的方法，將表現基因的質體與大部分的病毒基因同時送入細胞。

目前發現，腺病毒載體容易誘發細胞產生發炎性免疫反應，這是一個急待解決的缺點。

利用SV40病毒為轉殖基因的途徑有二。

其一為製造SV40DNA與外來DNA片段的重組體（recombinants）然後將其移入容許的細胞中，產生含有重組DNA的病毒顆粒。

另外一種方法，是製造SV40DNA與外來DNA片段的重組體如前述，但是不形成病毒顆粒。

重組後的DNA可以移入細胞內暫時地以類似質體（plasmid-like）的形式自行複製，或插入細胞染色體中成為染色體的一部份。

任何帶有SV40複製始點的DNA均能自行複製插入SV40中的外來DNA，至少暫時會隨之在細胞染色體外開始複製。

含有SV40複製始點及外來基因的重組DNA，於進入COS細胞後會大量複製。

因此在這種似質體的DNA上外來基因，其轉錄機轉得以研究。

在一個實驗中學者發現，外來的b-球蛋白（b-globin）基因，能正確地開始轉錄，而且產生適當接合（spliced）的mRNA。

非病毒載體： 　　利用物理或化學方式把基因送入細胞。

安全性較高，比較沒有副作用，但其轉殖效率則較差。

物理方式：如顯微注射法（Microinjection）、電穿孔法（Electroporation），甚至直接將DNA打入肌肉內。

現在的病毒載體發現比較容易使接受此載體生物體感染，而非病毒病毒則沒有此問題，淡用病毒載體比較適合作體內的載體，現在正待此問題解決後，再做更進一步的研究。

參考資料 http://zh.wikipedia.org/wiki/DNA 專題報導生物科技的應用.pdf     敘述如何使自己培養的植物欣欣向榮 　　一般而言，一年生草本植物，如果有良好的環境及適當的管理技術，就可以延長其壽命；多年生植物如果缺乏適合的環境，或遇到致命的限制因子(太熱、太冷、太乾、太濕…。

)就可能在某一個季節結束生命，我們就必須避開那個季節，以一年生植物的方式來栽培。

當然，那些致命的限制因子，也不是完全無法克服，有許多溫帶植物，在夏季時移入透明遮雨棚內，限制給水，讓他呈現半休眠狀態，就可以安全越夏。

不耐寒的植物，可以在溫室內越冬。

甜菊和紫蘇，冬季在溫室內栽培，利用電照加上適當的修剪來延長壽命。

原產於溫帶的百里香，如果種在排水良好，有斜坡的石礫地，就算是炎熱的夏天也能存活。

所以，要以一年生或多年生栽培，並不完全取決於其原始型態，而是要配合環境及管理技術來決定的。

以下四種方式，可以使自己所培養的植物長得更好的方法，分別是土壤與肥料、水份的供給、陽光、修剪與採收。

一、土壤與肥料 　講到植物的土壤和肥料之前，先談談植物是如何自行產生養分的。

植物葉肉細胞中的葉綠體之葉綠素吸收太陽能，把二氧化碳和水合成葡萄糖的過程稱為光合作用。

　　　光合作用的過程 　     (1)光反應:葉綠素吸收太陽能，把水分解成氧氣、(氫)和能量，並將產生的氧氣釋放到大氣的過程。

(2)暗反應:葉綠體基質中的酵素，利用光反應所產生的能量及(氫)，將二 氧化碳轉換成葡萄糖和水的過程。

暗反應並需要在黑暗中進行，而是指該反應進行與光罩沒有直接關係。

　　每一種植物對土壤的需求不同，但是，大部分植物都能接受的土壤是—排水良好的沙質壤土，酸鹼值大約在6～7之間。

如果是盆栽，則建議購買以泥碳苔為主成分的培養土，再自行調配1╱4的河沙。

肥料供給，需以植物的生長狀態作判斷。

生長季時多施肥;生長停滯期則不要施肥;草本植物則是在每次修剪後就要施肥。

　　如果發現植物下層老葉開始變黃，就表示其缺少主要元素，要馬上供給氮、磷、鉀三要素，若待整株變黃則很難恢復元氣;如果發現植物頂芽顏色開始變淡甚至白化，就表示缺乏微量元素。

如果發現上述狀況，在施肥後仍無法改善，以盆栽而言，需換盆?加新土或換土;如果是露天栽培，就要檢驗土壤的PH值，太高或太低，都會障礙植物對肥料的吸收。

二、水份的供給 　　植物的根所吸收的水分，運輸到莖及葉後，除部分在細胞中利用外，大部分經由葉表面的氣孔散失到空氣中分由植物氣孔散失到空氣中的現象，稱為蒸散作用。

蒸散作用可以調節植物的體溫，且有助於植物吸收水分。

此外，蒸散作用是植物體內水分上升的主要動力之一。

　　木質部細胞在植物的根﹑莖及葉中，相連接形成細管內充滿著水，當水分從氣孔蒸散出去時，便會產生拉力，將細管內的水往上牽引。

於是，莖內的水便上升到葉脈，根部的水也隨之上升到莖中。

在生長季時，水份需求量較大;在生長停滯期則要限水。

環境中的陽光強通風好，則水份蒸散較快，需補充較多水份;反之，在陰暗或通風不良的環境則需限水。

特別建議，要判斷需不需要澆水？多久澆一次水？最好的方法是用手直接去觸摸土壤，如果覺得還濕濕的，就不要澆水，如果覺得有一點乾才澆水。

澆水就要一次澆到溼透為止。

有一些需水量較大的盆栽植物如：薄荷、澳洲茶樹，最好擺在蓄水盤上，以利充份給水。

有些植物很不耐積水，如：薰衣草、迷迭香，在澆水後要把多餘的重力水滴乾。

在雨季時，空氣溼度很高，任何植物都要適當限水以避免感染病菌。

三、陽光 大部份的的香料藥用植物都要全日照栽培(參考資料庫)，栽培環境是否有足夠的陽光是很重要的，所以，就算是在炎熱的夏季，也不建議將植物移入陰棚(黑網室)下栽培，最好是用透明的塑膠遮雨棚，既可濾掉部份輻射熱，又可避免雨水過度淋洗。

香料作物，在陽光充足的環境下風味較佳;藥用植物在光線不足的狀況下栽培，會影響藥效。

如果在家中陽台栽培，北向的陽台沒有直射的日光，只能種較耐陰的薄荷、羅勒、鴨兒芹…，但，多少會影響香氣。

什麼是全日照？ 當你覺得栽培環境的光線很充足，並不表示它具備足夠的日照，這一點讓很多初學者無法作正確判斷，所謂全日照，就是直接曝曬在太陽下，夏季超過8時，冬季超過5小時。

在夏季，早晨的陽光較溫和，適合直接曝曬;午後的溫度過高，可在西邊做適度遮陰。

如果是在家中陽台，夏季最好是在東向的陽台，冬季則選擇南向。

四、修剪與採收 木本植物，要在春末時將接近地面的老枝條剪除，以利通風並避免感染，若要將植株剪矮，需保留部份綠色未木質化的枝條及葉子，以利萌芽。

春、秋兩季是快速成長期，可以大量修剪，採收利用。

開花植物，要選在花謝後修剪，澳洲茶樹平地開花期在四月份，花後修剪一次，如果生長太快，要做第二次修剪，則最好選在十月以前，以免影響翌年的開花。

薰衣草在春季開花，採收並修剪後，限制水及養分之供給，準備越夏，如果有安全度過夏天，秋末還會再開一次花以供採收。

草本植物，大部份採用齊頭式修剪，薄荷的高度若超過25cm，就要理一次約5～10cm的平頭，香蜂草也一樣。

甜菊及羅勒的單一枝條，若超過四對葉子，就要摘心，只留1～2對葉子。

在水份及肥料充分供給的條件下，大部份的草本植物越修剪會長得越茂盛，所以，千萬不要捨不得剪，剪下的枝條若一時用不完，可以乾燥或冷凍保存。

結語 　　在過程中發現要培養一豬好的植物其實還蠻困難的，水不能太少，植物會乾死，水太多，根又會泡爛，土壤的酸角值要在六到七之間，陽光的強弱、方向都要顧好，肥料施放與否，也要看植物的發育的進度，才能施放，而且不是越多越好呢，總之，要照顧一株植物功夫和學問都是不能少的。

      參考資料 1.http://134.208.20.72/genedu/handouts/94_2/生物技術概論/0502-醫藥生物技術.doc 2.http://biotech.nstm.gov.tw/08/083.asp?str=Vector 3.有機土壤http://www.hdais.gov.tw/04/proceedings/2005/2005_4/9406_2_5.pdf 4.http://vschool.scu.edu.tw/HAPPY1/project1/course/chapter4/section4.htm