gRNA Plasmid(質體建構)-CRISPR Services (基因編輯服務)

載體類型除了送入細胞方式的不同(慢病毒、轉染或AAV 系統)，還有不同的作用方式(圖一)。

除了最初發現的Cas9 造成DNA 雙股斷裂(DSB) 之外，後來科學家們還研究出DNA 單股 ... gRNAPlasmid(質體建構)-CRISPRServices(基因編輯服務)-盟基生物科技股份有限公司 首頁 客製化服務 CRISPRServices(基因編輯服務) gRNAPlasmid(質體建構) CRISPRServices(基因編輯服務) GeneServiceGeneSynthesisGene/DNAFragmentsServiceIVTDNA/RNAoligosiRNA/miRNAGenCRISPRgRNADNA突變圖庫(Mutantlibrary)DNA組合圖庫(Combinatoriallibrary)CRISPRServices(基因編輯服務)gRNAPlasmid(質體建構)gRNAPlasmidLibrary(質體圖庫)sgRNAsynthesis(sgRNA合成)ssDNAsynthesis(長片段單股DNA合成)Stablecellline(細胞株建構)Microbialgeneediting(細菌株建構)PeptideServicesPeptidesynthesisPeptidelibraryProteinExpressionProteinExpressionStablecelllineStablecelllineservicesforassayapplicationsCustomizedantibodyPolyclonalantibodyMonoclonalantibody化合物合成(CompoundSynthesis)OrganicCompoundSynthesis有機化合物合成客製化生物技術服務酵素結合免疫吸附分析(ELISA)多重因子檢測分析(MultipleImmunoassays/Luminex)呈色/螢光分析套組檢測(Assaykit)流式細胞技術分析(FlowCytometry)西方墨點法分析(WesternBlot)核酸表現分析(PCR,qPCR)腫瘤移植動物模型腫瘤移植動物模型 gRNAPlasmid(質體建構) CRISPRServices(基因編輯服務) gRNAPlasmid(質體建構) 編號： 將設計好的gRNA接入特定載體，提供最方便的gRNA庫存質體，也能由客戶自行提供gRNA序列，並選擇適合的載體，由GenScript完成質體建構。

原價： 特價: 數量/ 點我詢問 詳細內容 CRISPR被稱為第三代基因編輯技術，相較於先前的TALEN與ZFN系統而言，CRISPR操作更簡單，且成功率更高。

ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats(CRISPR)andCRISPR-associatedprotein(Cas)為細菌特殊的免疫系統，保護細菌免受病毒感染。

CRISPR技術是由Cas9蛋白質透過gRNA和目標基因的鹼基配對互補性，專一性結合目標基因染色體DNA，並進行雙股裁切(doublestrandbreak,DSB)。

而發生DSB的染色體會以兩種方式修復，NHEJ(non-homologousendjoining)容易造成基因功能缺失(knockout)，而HDR(homology-directedrepair)引入ssDNAtemplate則可以插入或置換特定序列(knockin)。

鹼基配對的特性使得CRISPR專一性更高，操作和設計更簡單，因此被廣泛應用於基因工程領域。

GenScript提供CRISPRplasmid質體建構服務，讓您快速拿到CRIPSR工具。

一、服務介紹 GenScript和張鋒實驗室共同合作(FengZhang’slaboratoryattheBroadInstituteofMITandHarvard)，免費提供gRNA資料庫，並且超過20,000條gRNA已建構成庫存質體(載體為pLentiCRISPRv2，SpCas9系統、慢病毒表現系統)，可以直接購買快速到貨。

同時，客戶也能提供自行設計或文獻中的gRNA序列，並選擇不同的載體，由GenScript完成質體建構。

載體類型除了送入細胞方式的不同(慢病毒、轉染或AAV系統)，還有不同的作用方式(圖一)。

除了最初發現的Cas9造成DNA雙股斷裂(DSB)之外，後來科學家們還研究出DNA單股斷裂(SSB)和促進基因表現(SAM)的特殊Cas9，GenScript提供五種Cas9系統供客戶選擇(表一)。

(完整載體資訊請點選此連結) (GenScript亦提供human和mouse全基因的gRNA質體圖庫，請點選此連結)   圖一：三種Cas9作用方式，(a)最初的CRIPSR作用方式，造成染色體DNAdoublestrandbreak(DSB)，引發NHEJ。

(b)特殊突變Cas9n，只能造成染色體DNAsinglestrandbreak(SSB)，需要同時有兩個位點作用才能引發NHEJ，造成DNA缺失。

(c)特殊去活性Cas9(dCas9)，不會造成DNA斷裂，而是攜帶活化因子促進特定基因表現(synergisticactivationmediator,SAM)。

表一：五種Cas9系統比較 系統名稱 *作用方式 應用 說明 SpCas9 DSB 一般使用 最早應用於基因編輯的CRISPR系統，來自於S.pyogenes的typeIICRISPR系統。

eSpCas9 DSB Off-Target較低 為SpCas9經過三個點突變(K848A,K1003A,R1060A)，可以減少non-targetDNA的結合，大幅提高專一性。

SpCas9Nickase(Cas9nD10A) SSB 使用上必須同時引入兩段gRNA，Off-Target較低 為SpCas9經過一個點突變(D10A)，此突變會導致Cas9只能進行單股核酸裁切(SSB)。

使用上必須同時引入兩段gRNA，辨認鄰近的區域(需要是DNA雙股各一股)，造成兩個鄰近的單股DNA斷裂，才能夠引發NHEJ，造成基因缺失，因此可以大幅度降低off-target，增加專一性。

SaCas9 DSB Cas9蛋白質較小，AAV包裝專用 來自於Staphylococcusaureus，作用效率和SpCas9差不多，但是SaCas9蛋白質較小(少1kbDNA)，較適合Adeno-AssociatedVirus(AAV)包裝。

TranscriptionActivation(SAM)Plasmids SAM 去除活性的Cas9(dCas9)，接上Transactivationprotein，用來專一性地促進特定基因表現 為特殊的CRISPR系統，其中Cas9透過突變而失去核酸裁切的功能(dCas9)，同時又接上transactivationprotein(VP64)，sgRNA也經過特別設計(加上twoMS2RNAaptamers)，用來專一性地促進特定基因表現。

 *DSB,DNAdoublestrandbreak;SSB,DNAsinglestrandbreak;SAM,synergisticactivationmediator. 二、服務應用 1.針對目標基因做knockin或knockout： SpCas9,eSpCas9,SpCas9nickase,SaCas9皆能夠造成DNA雙股或單股斷裂，其中SaCas9適用AAV系統，而SpCas9nickase只能造成DNA單股斷裂，比較資訊請參考表一。

2.針對目標基因促進基因表現： SAM系統不會造成DNA損傷，失去活性的Cas9蛋白質會帶著transactivationprotein，因此反而會促進基因表現，比較資訊請參考表一。

三、服務優點 1.免費gRNA資料庫： GenScript和張鋒實驗室共同合作(FengZhang’slaboratoryattheBroadInstituteofMITandHarvard)，免費提供gRNA資料庫，資料庫中的gRNA序列皆已經過驗證，能夠有效地針對目標基因，讓您放心做選擇。

(免費gRNA資料庫請點選此連結)   2.提供gRNA庫存質體，最快一週到貨： 原廠提供超過20,000條gRNA庫存質體(預設載體為pLentiCRISPRv2)，下訂後可於一週到貨。

3.多種Cas9系統選擇： 五種Cas9系統選擇，SpCas9,eSpCas9,SpCas9nickase,SaCas9,SAM，對應三種作用方式(表一)。

4.多種載體型式可選擇： 多種載體型式可選擇[轉染用、慢病毒系統[all-in-one或dualvector(gRNA和Cas9分開]、AAV系統](完整載體資訊請點選此連結)。

四、服務方案 1.客戶提供： (1)基因名稱(Genesymbol/ID)orgRNA序列 (2)指定載體 2.出貨規格： (1)4ug凍乾質體 (2)定序結果   推文