什麼是載體

用於基因轉殖的轉移感染技術，是一種可攜帶DNA、RNA或蛋白質片段進入宿主細胞進行複製的媒介物質。

根據作用可區分為： · 載體的條件容易製備、能存活於宿主細胞裡並大量 ... 什麼是載體？　１１／０８　黎耀基老師 載體（vector） 用於基因轉殖的轉移感染技術，是一種可攜帶DNA、RNA或蛋白質片段進入宿主細胞進行複製的媒介物質。

根據作用可區分為： (1)使用來選殖、重組、複製或保存DNA片段之載體稱為選殖載體（cloningvector）。

(2)作為表現基因或製造蛋白質之載體稱為表現載體（expressionvector）。

載體的條件 容易製備、能存活於宿主細胞裡並大量複製。

沒有強烈的副作用，不會引起腫瘤的產生。

有多個限制?切點與標記基因，可以準確地傳送基因到指定的專一性標的細胞、準確地插在特定的染色體位置。

載體種類大致上有三大類， 一、細菌的質體(plasmid)。

（一種獨立於染色體之外自行複製的環狀遺傳單位） 二、病毒與噬菌體。

根據基因轉殖的目標生物體不同，會影響所要利用的載體種類，對於動物時使用的則是利用動物病毒中的反轉錄病毒或腺病毒感染宿主細胞（前者只在持續分裂中細胞反應且可能嵌錯位子，後者則較不穩定），在植物時則使用能感染植物的農桿菌與含有T-DNA質體（外源基因載體）的大腸桿菌一起培養，將基因片段導入農桿菌，在以農桿菌的Ｔｉ質體為媒介導入植物細胞。

一般來說，天然的載體常不太符合條件，所以常因需要人工改造載體，且現今有人工的細菌染色體載體。

三、非病毒載體 如病毒載體般，能將基因片段轉入細胞內的轉染方法： １、脂小體：由一層或多層的脂質雙層所構成的同心球體，「夾帶」DNA進入細胞，利用DNA的負電可與脂質帶正電相結合的特性，當脂小體與細胞共同培養時，部分就被吞入，外來DNA也就進入細胞內了，但傳遞的DNA不會嵌入受感染細胞的染色體上。

它的缺點是效益不佳，需重複注射。

２、電穿孔：電場造成細胞膜形成暫時性孔洞，並使細胞膜通透性增加，讓DNA進入細胞內。

操作方便、快速，但電壓過高會電死細胞，低則ＤＮＡ不易進入。

３、顯微注射：則是用減壓將細胞以極細的針頭吸附，再使用pipettetip直接注入ＤＮＡ到細胞中。

有效率且可控制注射量與部位，但昂貴且可能傷害細胞所以需要熟練的操作人員。

４、基因槍：利用高壓氦氣傳送ＤＮＡ（附著於金屬微粒）進入細胞內。

適用於大多細胞，甚至用於粒線體及葉綠體，且與微注射(microinjection)的方式比較，此方法為簡單、快速。

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　ＬＣ０１７許任鈞