PCR技术原理、实验步骤和应用- 实验方法- 丁香通

一、实验目的 1.掌握聚合酶链式反应的原理。

2. 掌握移液枪和PCR仪的基本操作技术。

二、实验原理 PCR技术，即聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）是由 ... 丁香通 丁香园 论坛 丁香客 医药招聘 丁香医生 更多 会议 调查派 用药助手 丁当铺 丁香搜索 医药数据库 丁香诊所 来问医生 我要登录 | 免费注册 | 我的丁香通 卖家： 成为卖家 更多合作 买家： 买家中心 移动端 发布求购 用户服务 产品 实验 品牌 搜索 搜产品 搜产品 搜实验 搜品牌 大家都在搜 搜索 发布求购 全部产品分类 首页 丁香实验new 促销 试用中心 学术专区 资讯 品牌学堂 丁香学社 试剂 🔥研选正品-丁香通研选> 生化试剂 化学试剂 生物化学 检验试剂 蛋白质类 蛋白质/抗原/多肽 蛋白检测 蛋白分析 蛋白纯化 蛋白修饰 标准品/对照品 酶 核酸类 核酸/蛋白合成 核酸分析 核酸检测 核酸纯化 DNA/RNA cDNA及合成纯化 RNAi技术 PCR/RT-PCR 分子类 文库及构建 克隆与表达 表达分析 细胞生物学检测 免疫检测 药物/生物类 药物筛选 动物/植物 微生物 饲料类 造模饲料 抗体 🔥研选正品-丁香通研选> 一抗 一抗 WB二抗 westernblot二抗 免疫组化抗体 免疫组化二抗 磷酸化抗体 磷酸化特异抗体 激酶和磷酸化抗体 亚型对照抗体 裂解液对照 组织对照 其他抗体 蛋白A，GPLUS 肿瘤抑制/凋亡抗体 信号分子抗体 结构蛋白抗体 抗体纯化 试剂盒 western 免疫组化试剂盒 放射免疫试剂盒 流式细胞试剂盒 细胞库/细胞培养 🔥研选正品-丁香通研选> 细胞库 普通细胞 原代细胞 ATCC细胞 干细胞 细胞株 细胞培养 细胞扩增 血清 血清替代物 细胞培养基 细胞培养添加物 培养基/琼脂混合物 细胞因子、趋化因子和生长因子 琼脂 胰酶中和液 蛋白胨 多聚赖氨酸 氨基酸混合物 盐溶液 细胞分散试剂 消泡剂 细胞检测 细菌检测 支原体检测 支原体消除 细胞繁殖检测 导向毒素 ELISA试剂盒 🔥研选正品-丁香通研选> 动物ELISA试剂盒 人ELISA试剂盒 小鼠ELISA试剂盒 大鼠ELISA试剂盒 兔ELISA试剂盒 猪ELISA试剂盒 细胞ELISA试剂盒 细胞因子 细胞调亡 疾病检测ELISA试剂盒 心肌梗塞检测 内分泌检测 血栓与止血 肝纤维化检测 自身免疫检测 优生优育检测 传染病检测 其它 肿瘤标志物检测 激素 骨代谢 特种蛋白检测 活性多肽 其它 技术服务 分子生物学 DNA测序 DNA提取/纯化 RT-PCR服务 RNAi全套服务 分子生物学 载体构建 分子生物学整体服务 细胞生物学 细胞培养 流式细胞检测 细胞毒性测试 细胞生物学 干细胞服务 细胞因子生物检测 蛋白质相关 蛋白质组综合服务 蛋白制备 质谱服务 蛋白质相关 NMR分析 免疫学 抗体制备 抗体纯化 抗体标记 免疫组化/免疫沉淀/Western 免疫学 生物信息学 生物信息学服务 生物信息学 其他 生物芯片 生物芯片制备 蛋白芯片服务 组织芯片服务 生物芯片 微生物学 微生物鉴定 抑菌作用测试 内毒素测试 微生物学 发酵服务 病理学 病理学服务 组织学服务 病理学 动物实验 转基因动物定制 动物进出口 基因敲除 动物实验 实验整体外包 CRO综合服务 实验室定制服务 实验整体外包 耗材 🔥研选正品-丁香通研选> 常用耗材 吸头 瓶 管 微孔板 过滤 培养 PCR耗材 PCR管 PCR条板 PCR板 实时定量PCR毛细管 分子类 分子生物学膜 色谱相关 色谱柱 色谱介质 色谱配件/耗材 光谱配件/耗材 实验类 仪器配套 常用耗材 生物芯片 个人防护 手套 口罩 实验室用服 鞋帽 书籍/软件 软件 序列分析 流式分析 结构分析 图象分析 实验分析 生物芯片 凝胶分析 实验室信息化管理 仪器设备 统计 医学科研 文本分析 医用软件 网站建设及服务器 临床基础 内科学 外科学 书籍 临床医学 基础医学 药学书籍 生物医学 医学外语 医学考试 原版书 其它 生物医学 普通生物学 细胞生物学 遗传学 生理学 生物化学 生物物理学 分子生物学 生物工程学 微生物学 基础医学 医用一般科学 人体形态学 人体生理学 病理学 医学免疫学 医学遗传学 心理学 实验室仪器/设备 🔥研选正品-丁香通研选> 分析类仪器 色谱 质谱 光谱 同位素分析 测读系统 物理特性测定 显微镜 影像系统 显微镜 实验室常规 常用设备 移液器 低温制冷 清洗消毒 天平 核酸提取纯化 实验设备 基因蛋白组 环境检测 生物芯片 细胞分析 生化/细胞培养 组织学设备 电化学 分子生物学 动物实验仪器 神经生物学 医药设备 制药设备 药物检测 临床检验设备 免疫分析系统 尿液分析系统 血气分析系统 血液分析系统 生化分析系统 临床检验设备 实验室自动化 核酸提取纯化 蛋白纯化系统 全自动分液系统 全自动血液采样系统 论文服务 🔥研选正品-丁香通研选> 写作润色 专业翻译 论文写作 论文润色 课题研究 课题设计 课题申报 标书咨询 文章投稿 论文投稿 期刊选定 其他 原辅料包材 🔥研选正品-丁香通研选> 原料药 呼吸系统类 消化系统类 循环系统类 血液系统类 神经系统类 解热镇痛类 辅料 崩解剂 润滑剂 赋形剂 增塑剂 中间体 酸类 羧酸 羧酸盐 醇类 酮类 醛类 包材 输液包材 药用瓶 药用胶塞 肠溶材料 包衣材料 医疗器械 🔥研选正品-丁香通研选> 外科手术器械 基础外科手术器械 显微外科手术器械 神经外科手术器械 眼耳鼻喉科手术器械 胸腔心血管外科手术器械 腹部盆腔外科手术器械 矫形外科手术器械 妇产科及计划生育手术器械 烧伤整形手术器械 口腔科手术器械及设备材料 基本设备 普通诊察器械 手术室、急救室、诊疗室设备及器具 医用卫生材料及敷料 消毒和灭菌设备及器具 检验设备 医用电子仪器设备 医用光学器具仪器及内窥镜 医用超声激光仪器设备 医用高频及物理治疗仪器设备 中医器械 临床检验分析仪器 医用化验和基础设备器具 体外循环及血液处理设备 医用影像放射设备 其他 植入材料和人工器官 病房护理设备及器具 输液和穿刺设备 其他设备 体外诊断 🔥研选正品-丁香通研选> 生化诊断 生化诊断 免疫诊断 放射免疫 酶联免疫 胶体金 荧光免疫 化学发光 免疫印迹 免疫诊断 分子诊断 PCR 原位杂交 基因芯片 基因测序 分子诊断 微生物诊断 药敏试验 培养与形态观察 全自动微生物分解系统 微生物诊断 POCT 血糖监测类 心血管类 炎症类 凝血类 妊娠类 POCT 基因检测 基因检测 ICL-第三方医学检验 ICL-第三方医学检验 其他 临床生化检验试剂 其他试剂 首页 实验方法 PCR技术 PCR技术原理 PCR技术原理、实验步骤和应用 PCR技术原理、实验步骤和应用 PCR技术原理、实验步骤和应用 关键词： PCR 聚合酶链反应 模板DNA 来源： 互联网 240415阅读 PCR技术原理、实验步骤和应用有问题？丁香实验库全新大升级，10000+实验方法任你选 前往丁香实验 一、实验目的 1.掌握聚合酶链式反应的原理。

2.掌握移液枪和PCR仪的基本操作技术。

二、实验原理 PCR技术，即聚合酶链反应（polymerasechainreaction，PCR）是由美国PECetus公司的KaryMullis在1983年（1993年获诺贝尔化学奖）建立的。

这项技术可在试管内的经数小时反应就将特定的DNA片段扩增数百万倍，这种迅速获取大量单一核酸片段的技术在分子生物学研究中具有举足轻重的意义，极大地推动了生命科学的研究进展。

它不仅是DNA分析最常用的技术，而且在DNA重组与表达、基因结构分析和功能检测中具有重要的应用价值。

PCR可以被认为是与发生在细胞内的DNA复制过程相似的技术，其结果都是以原来的DNA为模板产生新的互补DNA片段。

细胞中DNA的复制是一个非常复杂的过程。

参与复制的有多种因素。

PCR是在试管中进行的DNA复制反应，基本原理与细胞内DNA复制相似，但反应体系相对较简单。

PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应做准备； ②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合； ③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在Taq酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。

重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。

每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

三、实验试剂与器材 模板DNA、2.5mmol/LdNTP TaqDNA聚合酶（5U/μL）、SSR引物 10×buffer、15mmol/LMg2+、ddH2O PCR仪、移液枪、PCR板 四、实验步骤 1、配制20μL反应体系，在PCR板中依次加入下列溶液： 模板DNA2μL 引物11μL 引物21μL dNTP1.5μL MgCl22μL 10×buffer2μL ddH2O10μL Taq酶0.5 超方便的实验干货查询工具 微信扫码进入「丁香实验」小程序 上一页 1 2 下一页 经验交流 高相许 电泳时条带跑出凝胶，是什么情况？ 电泳时条带跑出凝胶，是什么情况？不会没成功吧?   15 评论 彩虹伊伊WB9C 双非博士真就如大家所说没有出路？ 双非博士一枚，在老师的指导下，自己也算勤奋，发了三四篇SCI，其中有一篇顶刊，手头上还有一些工作没有处理完，本来心里有些自卑，面对现在外界所说双非博士的各种言论，导致自己有些不知所措。

以后进高校，哪怕你有好文章也是会四处碰壁嘛？想问问过来人的经验。

  14 评论 且行且乐 PCR有产物但是电泳无结果 PCR后用紫外分光测定DNA含量都在450-500ug/ul，但电泳无目的片段的条带，内参也没条带。

电泳中maker能跑出条带，用引物也点了样，引物的条带稍模糊但还是有，请问是哪里出了问题？   13 评论 感兴趣的产品 pcr技术实验步骤 pcr技术实验步骤详细 pcr实验步骤 pcr技术步骤 普通pcr实验步骤 pcr实验步骤详细 qpcr实验步骤 pcr具体实验步骤 pcr技术应用 pcr技术步骤复性 pcr技术步骤图 pcr技术主要步骤 感兴趣的厂家 pcr技术实验步骤厂家 pcr技术实验步骤详细厂家 pcr实验步骤厂家 pcr技术步骤厂家 普通pcr实验步骤厂家 pcr实验步骤详细厂家 qpcr实验步骤厂家 pcr具体实验步骤厂家 pcr技术应用厂家 pcr技术步骤复性厂家 pcr技术步骤图厂家 pcr技术主要步骤厂家 版权声明 本网站所有注明“来源：丁香园”的文字、图片和音视频资料，版权均属于丁香园所有，非经授权，任何媒体、网站或个人不得转载，授权转载时须注明“来源：丁香园”。

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