非農藥資材防治胡瓜露菌病之研究試驗__臺灣博碩士論文知識加 ...
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Pseudoperonospora cubensis引起之露菌病(downy mildew)是胡蘆科作物重要的病害之一,雖然化學藥劑可以有效防治胡瓜露菌病,但抗藥菌系的出現與化學農藥對於環境與人類 ...
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Pseudoperonosporacubensis引起之露菌病(downymildew)是胡蘆科作物重要的病害之一,雖然化學藥劑可以有效防治胡瓜露菌病,但抗藥菌系的出現與化學農藥對於環境與人類的負面效應,發展替代的防治策略成為我們努力探討的目標。
本研究主要目的在於建立胡瓜露菌病菌的接種平台,進而評估非農藥資材防治胡瓜露菌病的可行性。
將P.cubensis孢囊點滴接種於胡瓜切離葉,於20-24℃第四天可引起水浸狀病徵;此外將孢囊(5sporangia/10μl)點滴接種於胡瓜切離葉片後,在20℃每天光照12小時的生長箱中,保濕培養7天後,發現葉齡14和21天之胡瓜切離葉的發病率最高可達90%以上,且可產生較多量的新孢囊。
將接種過的切離葉於不同時間切取葉片圓盤,移置於飽和chloralhydrate(250g/100ml)中脫色後,再以lacto-phenolcottonblue進行染色,隨後於光學顯微鏡下觀察,發現露菌游走孢子於接種後8小時內可在氣孔附近形成靜止子;在第16小時前則已發芽侵入葉組織內部。
篩選胡瓜露菌病的防治資材試驗中,發現250ppm的自製油酸鉀(potassiumoleate),可完全抑制孢囊的萌發;至於市售之油酸鉀濃度需要500ppm才可有同等的抑制效果。
利用油酸鉀分別將葵花油(SFO)、花生油(PNO)、大豆油(SBO)及苦茶油(CAO)乳化後,以胡瓜切離葉片接種平台評估,發現以油酸鉀乳化葵花油、花生油和大豆油之製劑,其250倍稀釋液可顯著減少60%露菌病的罹病率。
在溫室中測試植物油乳化製劑的防病效果,發現油酸鉀乳化葵花油製劑及花生油製劑之250倍稀釋液,於接種病原菌前24小時施用於胡瓜植株上可顯著降低露菌病罹病度達20%左右。
測試不同無機物質對露菌孢囊萌發的影響試驗中,發現10ppm二氧化氯可完全抑制露菌孢囊的萌發。
此外,將BacillusmycoidesBM02發酵液添加不同濃度幾丁聚醣(CN)後,進而處理胡瓜露菌病菌,發現CN的濃度可顯著影響露菌病菌孢囊的發芽率,當CN濃度在0.5%以上,其500倍稀釋液可抑制89%的孢囊萌發;若CN濃度達2%時,即可完全抑制孢囊的萌發。
進一步,在溫室以BMCN2(在BM02發酵液中添加2%CN)、PO-A(市售之油酸鉀)及PO-B(自製之油酸鉀)分別噴佈於胡瓜植株,其中250倍和500倍的BMCN2稀釋液可顯著減少胡瓜露菌病的發生,並減少17%和18%的罹病度;此外,於接種前施用PO-A和PO-B也可有效減少胡瓜露菌病的罹病度11%和20%。
在接種前將BMCN2製劑澆灌處理於胡瓜植株根部,結果隨著澆灌次數增加,胡瓜植株發生露菌病的罹病度會隨之下降,其中BMCN2100倍稀釋液可降低罹病度達36.7%。
綜合上述成果,証明植物油乳化製劑SFOE、PNOE和SBOE及微生物製劑BMCN2可推薦給農友作為防治胡瓜露菌病的非農藥資材。
中文摘要........................................................................................................................i英文摘要...................................................................................................................iii目次.............................................................................................................................vi表次?引.....................................................................................................................ix圖次?引......................................................................................................................x前言.............................................................................................................................1材?與方法..................................................................................................................6一、供試植物........................................................................................................6二、供試菌株?源、分?和觀察........................................................................6三、供試菌株繁殖、培養及保存........................................................................6(一)以???培養菌種........................................................................................6(二)以?圓盤培養菌種........................................................................................7(三)菌株保存........................................................................................................7四、接種源製備與接種方法................................................................................8(一)噴佈接種法....................................................................................................8(二)點滴接種法....................................................................................................8五、病害發生條件分析........................................................................................8(一)溫?對P.cubensisPC-001孢囊釋放游走孢子之影響...............................8(二)P.cubensisPC-001孢囊釋放游走孢子之??............................................8(三)溫?對P.cubensisPC-001引起胡瓜????菌病之影響.......................9(四)病原菌接種源濃?對胡瓜?菌病發生之影響............................................9(五)?齡對胡瓜?菌病發生之影響....................................................................9(?)胡瓜?菌病菌侵染過程................................................................................9(七)胡瓜?菌病之溫室接種試驗......................................................................10?、非生物性資材防治胡瓜?菌病之效果評估..............................................10(一)油酸鉀製備..................................................................................................10(二)植物油之乳化法..........................................................................................10(三)?同濃?油酸鉀對P.cubensisPC-001孢囊釋放游走孢子之影響.........11(四)植物油乳化劑防治胡瓜?菌病之效果......................................................11(五)無機物質對P.cubensisPC-001孢囊釋放游走孢子之影響.....................12七、生物性資材防治胡瓜?菌病之效果評估..................................................12(一)?同濃?之幾丁聚醣添加於蕈?芽孢桿菌發酵液對P.cubensisPC-001孢囊釋放游走孢子之影響..................................................................................12(二)BMCN2防治胡瓜?菌病之效果...............................................................13八、溫室試驗......................................................................................................13(一)?同施用時間對於PO-A、PO-B和BMCN2防治胡瓜?菌病之影響.13(二)?同濃?BMCN2澆灌於胡瓜植株防治胡瓜?菌病之效果評估..........14(三)?同施用時間對於植物油乳化製劑防治胡瓜?菌病之影響..................14結果.........................................................................................................................15一、???培養胡瓜?菌..................................................................................15二、胡瓜?菌形態觀察......................................................................................15三、胡瓜?菌病發生條件分析..........................................................................15(一)溫?對P.cubensisPC-001孢囊釋放游走孢子之影響.............................15(二)P.cubensisPC-001孢囊釋放游走孢子釋放??......................................15(三)溫?對P.cubensisPC-001於胡瓜???引起?菌病之影響.................16(四)接種源濃?對胡瓜?菌病發生之影響......................................................16(五)?齡對於胡瓜?菌病發生之影響..............................................................16(?)胡瓜?菌病侵染過程..................................................................................16(七)胡瓜?菌病之溫室接種試驗......................................................................17四、非生物性資材防治胡瓜?菌病之效果......................................................17(一)?同濃?油酸鉀對P.cubensisPC-001孢囊釋放游走孢子之影響.........17(二)植物油乳化劑防治胡瓜?菌病之效果......................................................17(三)無機物質對P.cubensisPC-001孢囊釋放游走孢子之影響.....................18五、生物性資材防治胡瓜?菌病的效果..........................................................18(一)?同濃?之幾丁聚醣添加於蕈?芽孢桿菌發酵液對P.cubensisPC-001孢囊釋放游走孢子之影響..................................................................................18(二)BMCN2防治胡瓜?菌病之效果...............................................................18?、溫室試驗......................................................................................................19(一)?同施用時間對PO-A、PO-B和BMCN2防治胡瓜?菌病之效果.....19(二)?同濃?BMCN2澆灌於胡瓜植株防治胡瓜?菌病之效果評估..........19(三)?同施用時間對於植物油乳化製劑防治胡瓜?菌病之影響..................19討?...........................................................................................................................21?考文獻...................................................................................................................25
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